德国耶拿大学Christian Eggeling教授课题组,深耕荧光相关光谱技术(Fluorescence Correlation Spectroscopy,FCS)与STED-FCS技术在生命科学领域的落地应用,业内认可度极高。课题组科研博士后Francesco Reina深耕定量成像专项科研课题,现阶段正牵头搭建适配单分子轨迹追踪的一体化成像观测体系,核心整合干涉散射显微技术(Interferometric scattering,iSCAT)与全内反射荧光显微技术(Total Internal Reflection Fluorescence,TIRF)两大主流显微观测手段。
Reina博士坦言:“这套复合型观测技术体系,可依托超高帧频精准采集单分子层级的精细化科研数据。尤其依托iSCAT成像模式,我们能够实时捕捉生物分子在细胞膜脂质层、活性动态活细胞界面等各类生物表层结构中的扩散运动轨迹,所采集的实验数据可与传统FCS检测结果形成双向互补印证。同步联动搭载iSCAT与TIRF双模式协同成像方案后,团队能够依托超高采样精度,筑牢荧光信号特异性成像基础,精准完成活细胞样本全域单分子维度的精细化定量动态观测研判工作。”
图1 Prime BSI Express sCMOS 拍摄的 iSCAT 图像。大图显示金纳米颗粒标记的脂质在整个成像视野的脂质双分子层上的扩散。左下角的插图为玻璃表面上的一个 40nm 金纳米颗粒。
鉴于整套实验成像系统同步集成TIRF与iSCAT双模块成像功能,科研场景刚需单台适配度拉满的高性能相机,一站式适配双技术路径同步成像作业标准。其中,TIRF成像工况,对设备的微光探测灵敏度、全域空间解析精度、高速连续成像帧率三大核心硬件指标有着严苛要求;而iSCAT成像场景则进一步拉高了成像抓拍速度门槛,以此精准捕捉高速运动单分子的全域动态特征,筑牢实验统计数据完整性根基。Reina博士直面科研实操核心难点并作出说明:“我们的实验观测靶标聚焦完整单细胞及单细胞局部微区域,核心科研攻坚方向下沉至精准单分子观测维度。行业最优硬件配置标准,要求成像相机全域满视野工况下,稳定输出不低于100fps的高速成像能力。实际实操方案采用相机视野对半分区布设模式,依托单台成像设备,即可同步落地TIRF荧光成像与iSCAT散射成像同步并行采集作业。”
Prime BSI Express背照式sCMOS科研相机,完美契合本次多模式同步显微成像全场景科研工况,是一站式最优配套硬件方案。设备原生搭载超高感光探测性能(峰值量子效率95%,超低读出噪声1.1e-)、全域高速成像能力(全画幅原生帧率可达95fps)、超清成像解析水准(像素规格6.5μm×6.5μm)多重硬核参数优势,整机兼容性拉满、综合算力强劲,是科研级专用背照式sCMOS成像设备。科研人员既可锁定超小均质视场区间,完成高频快速图像采集作业;也可灵活拓宽全域成像视野,快速定位待测全新生物样本,全流程适配各类梯度精细化重复实验操作。
Reina博士实测反馈:“Prime BSI Express相机兼顾双模式成像刚需,既保障TIRF、iSCAT同步实验稳定高帧率输出,又具备灵活可调大视野适配优势,全流程上机调试、实验实操零故障、无适配难题。”
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