瑞士苏黎世大学医院的Epameinondas Gousopoulos教授团队,长期致力于淋巴水肿的相关研究。淋巴水肿是一种因淋巴系统功能异常,进而引发身体局部出现肿胀症状的疾病。为深入探究该疾病的发病机制,该团队已成功构建了相应的小鼠实验模型。Stefan Wolf博士介绍道:“我们通过外科手术的方式,将小鼠尾巴中的淋巴管切除,这一操作会诱发淋巴水肿,导致小鼠尾巴出现肿胀现象。随后,我们利用活体显微镜对尾巴内部的淋巴管展开成像观察。我们将淋巴特异性近红外(NIR)荧光示踪染料注射到小鼠尾巴尖端,再对尾巴内的染料流动情况进行成像,从而使毛细血管与淋巴收集器清晰可见。这一研究方法有助于我们深入解析淋巴水肿的潜在发病机制,同时也能用于筛选那些可能影响淋巴水肿发生,或是对淋巴管具有保护作用的新型药理化合物。”
图1 Prime BSI Express 拍摄的 NIR 染料流经小鼠尾巴的影像。尾巴的毛发、毛细血管和淋巴管都清晰可见。
活体成像技术主要用于对大型生物体进行成像观察,本研究中所针对的对象便是小鼠。由于小鼠存在呼吸运动及其他细微动作,这些都会对成像质量产生干扰,因此需要采用较小的放大倍数,以实现对大面积样本的捕捉。在这类成像场景中,通常会选用4倍至12倍的放大倍率,同时需要配备具有小像素规格的相机,这样才能更好地匹配奈奎斯特采样原则,进而获得理想的成像分辨率。低倍率成像同时也意味着更大的视场范围,因此搭载大尺寸传感器的相机同样具备显著优势。此外,该相机还需能够以视频拍摄的速率进行成像,从而精准捕捉染料在小鼠尾巴淋巴系统内的动态流动过程。另外,鉴于淋巴网络位于皮肤表层之下,需要借助近红外波长穿透尾部皮肤,对内部的荧光染料进行成像。这就对相机提出了明确要求,即其在近红外波段(约700纳米)需具备较高的灵敏度和量子效率,以确保能够更清晰地捕捉到成像信号。
Prime BSI Express背照式sCMOS相机,是适配该研究应用的理想设备。该相机拥有6.5微米×6.5微米的小像素尺寸、对角线长度达18.8毫米的大传感器,并且在近红外波段范围内具备出色的灵敏度,是一款体积小巧紧凑、功能却十分强大的sCMOS相机。Wolf博士将该相机与蔡司显微镜相结合,用于活体成像实验,二者可与Zen成像软件实现无缝衔接,操作过程顺畅无阻碍。Wolf博士表示:“我对Prime BSI Express相机的使用体验非常满意,我从未见过哪台相机能够在几乎无噪声的情况下,对如此微弱的信号进行清晰成像。它完全满足了我们对相机的所有预期,非常适合我们的研究应用需求!”
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